成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(通则0502)试验,吸取供试品溶液10-20μl、对照品溶液10μl,分别点于同硅胶h薄层板上,以乙酸丁酯-甲酸-水(7:2.5:2.5)的上层溶液为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。
“没有问题,下一步我们进行绿原酸和木犀草苷含量测定。只要证明了这两种元素的含量值,就能证明这种植物元素是有用的,再进行对照实验。”钟医说道。
“好,我进行第一种绿原酸,院长你进行第二种木犀草苷的含量测定。”彭林说道。
钟医点点人,立即着手用照高效液相色谱法进行测定。
他以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈-0.4%磷酸溶液(13:87)为流动相;检测波长为327nm。理论板数按绿原酸峰计算应不低于1000。又取了照品溶液的制备:取绿原酸对照品适量,精密称定,置棕色量瓶中,加50%甲醇制成每1ml含40μg的溶液。
供试品溶液的制备:取本品粉末(过四号筛)约0.5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入50%甲醇50ml,称定重量,超声处理(功率250w,频率35khz)30分钟,放冷,再称定重量,用50%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续滤液5ml,置25ml棕色量瓶中,加50%甲醇至刻度,摇匀。
最后,钟医分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5-10μl,注入液相色谱仪,测定,即得结果。
“本品按干燥品计算,含绿原酸(c16h18o9)没有少于1.5%。”钟医最后得出结论:“而绿原酸的抗菌、抗病毒,抑制突变和抗肿瘤,对心血管保护作用,和降压的作用,毋庸置疑。你们那边的木犀草苷了?”
“还在进行中。”彭林说道。
木犀草苷的对照液测定还在进行中,甚至比绿原酸更加的复杂。
不过最后得出,本品按干燥品计算,含木犀草苷(c21h20o11)的成分至少在0.050%。左右。
“而木犀草苷主要发生在呼吸系统作用,(木犀草苷有较强的呼吸道杀菌作用,它是新疆特有药材青兰中治疗气管炎的主要有效成分)和中枢系统作用(在实验中发现,木犀草苷可以缓解苯巴比妥的麻醉作用)已经得到了证明。”彭林说道。
“已经记录完毕。”乐寿在一旁说道。
钟医看了看实验的结果。
“进行药理作用实验!”钟医说道。
“好!”其他三人异口同声地说道。
十个小时过去了。
钟医宣布道:“事实证明,金银花具有广谱抗菌作用,对金黄色葡萄球菌、痢疾杆菌等致病菌有较强的抑制作用,对钩端螺旋体、流感病毒及致病霉菌等多种病原微生物亦有抑制作用;金银花煎剂能促进白细胞的吞噬作用;有明显的抗炎及解热作用。本品有一定降低胆固醇作用。其水及酒浸液对肉瘤180及艾氏腹水瘤有明显的细胞毒作用。此外大量口服对实验性胃溃疡有预防作用。对中枢神经有一定的兴奋作用。”
“这是不是就能证明银翘散有用了?”李建国紧张地说道。
彭林和乐寿看了李建国一眼,意思是,你太天真了。